脑组织属于多脂质特殊组织,建议用液氮研磨组织,用强力的蛋白提取液提取蛋白,防止蛋白降解(全程冰上操作,蛋白提取液要预先预冷。不要4℃放置太长时间)。在4℃旋转混合仪上进行充分裂解30min,裂解液要充分离心4℃,15000rpm,30min。小心的避开脂质层,取上清再加足量或者过量的Laemmli buffer,95℃,20min加热变性,如果看不见明显的脂质层,可以将离心时间延长至60min。 核蛋白和膜蛋白,这类蛋白的内源性表达量大部分较低,需通过专门的提取方式进行富集,然后裂解得到待测样本,这种类型蛋白的提取Kit商业应用已经很成熟,国内可供选择的品牌也很多。